黃曲霉毒素B1是寄生曲霉和黃曲霉的二級代謝產(chǎn)物,是已知的化學(xué)物質(zhì)中致癌性強(qiáng)的一種,在天然食物中常見黃曲霉毒素B1,危害性液強(qiáng)。目前,黃曲霉毒素B1的主要檢測方法有同位素稀釋液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法、高效液相色譜-柱前衍生法、高效液相色譜-柱后衍生法、酶聯(lián)免疫吸附篩查法及薄層色譜法。其中,高效液相色譜檢測耗時、操作方法復(fù)雜且昂貴。
近日,由中國糧油學(xué)會立項的《植物油脂中黃曲霉毒素B1的測定 膠體金快速定量法》團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿已經(jīng)完成,現(xiàn)面向有關(guān)單位公開征求意見,征求意見截止時間為2020年11月11日之前。
《植物油脂中黃曲霉毒素 B1 的測定 膠體金快速定量法》(征求意見稿)規(guī)定了膠體金快速定量法測定植物油脂中黃曲霉毒素B1含量的原理、試劑、儀器、試樣制備、操作步驟、結(jié)果表示和精密度等,適用于玉米油、花生油及成品油中黃曲霉毒素B1的測定。
據(jù)了解,使用膠體金快速定量法測定植物油脂中黃曲霉毒素B1的方法原理為試樣中的黃曲霉毒素B1與試紙條中的膠體金微粒發(fā)生呈色反應(yīng),顏色深淺與試樣中黃曲霉毒素B1含量有關(guān)。用定量檢測儀測定試紙條上檢測線顏色深淺,根據(jù)顏色深淺和定量檢測儀內(nèi)置曲線自動計算出試樣中黃曲霉毒素B1含量。
進(jìn)一步來看,上述方法應(yīng)用了競爭抑制免疫層析的原理,樣本中的黃曲霉毒素B1在流動的過程中與金標(biāo)記的特異性單克隆抗體結(jié)合,抑制了抗體和檢測線(T線)上固定的黃曲霉毒素B1偶聯(lián)物的結(jié)合,從而導(dǎo)致檢測線顯色亮度的變化。無論樣品中是否含有黃曲霉毒素B1,質(zhì)控線(C 線)都會顯色,以示檢測有效。當(dāng)層析結(jié)束后,該試劑條需采用定量檢測儀進(jìn)行檢測并通過該批次號的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出最終檢測結(jié)果,整個檢測過程需約20分鐘。
測定過程中使用的試劑有稀釋液和提取液,測定使用的儀器設(shè)備有天平、離心管、渦旋震蕩器、
離心機(jī)、微孔板、膠體金快速定量試紙條、金屬孵育器、移液器、定量檢測儀。
另外,關(guān)于重復(fù)性的問題,標(biāo)準(zhǔn)指出:在同一實驗室,由同一操作者使用相同儀器。按相同的測定方法,對同一被測試對象進(jìn)行互相獨(dú)立測試獲得的兩次獨(dú)立測試結(jié)果的絕對差值大于其算術(shù)平均值20%的情況不超過5%。
以上標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則按照 GB/T1.1-2009《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第 1 部分:標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)與編寫規(guī)則》、GB/T 20000.2-2009 《標(biāo)準(zhǔn)化工作指南第2部分:采用國際標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)則》、GB/T20001.4-2009《標(biāo)準(zhǔn)編寫規(guī)則第 4 部分:化學(xué)分析方法》的規(guī)定進(jìn)行編制。