液相色譜柱的使用方法
剛開始使用液相色譜柱的朋友有沒有一種抓狂的感覺?雖然液相色譜柱都自帶說明書,但說明書說的都比較籠統(tǒng),對(duì)于新手而言,還是有難度的。今天武漢恒信世紀(jì)科技有限公司就詳細(xì)跟大家談?wù)勔合嗌V柱的使用方法.
一、卡套柱的安裝(不加預(yù)柱)
1.將卡套架套入柱芯
2.將兩片夾套片嵌入柱芯的凹槽,使柱芯高 于夾套
3.將已套到柱芯上的卡套架向上推,直至高過夾套片
4.將卡套帽和卡套架旋在一起,然后用手?jǐn)Q緊
5.然后依同樣的 順序連接好柱子的另一端
6.連接到液相色譜儀,PEEK接頭手?jǐn)Q即可;若為不銹鋼接頭應(yīng) 使用專用扳手
7.將"子彈頭"預(yù)柱放入卡套片內(nèi)
注意:使用卡套柱時(shí),兩端的卡套應(yīng)時(shí)刻連接在柱芯上。不管您是平衡色譜柱或是清洗,任何時(shí)候都不能將卡套取下來,否則會(huì)造成填料 的流失。
?、?更換色譜柱濾網(wǎng)和玻璃棉過濾片(同時(shí)可以修補(bǔ)色譜柱)
注意:在取出反相柱芯的濾網(wǎng)和玻璃片之前,應(yīng)該將色譜柱充分用水和甲醇/乙腈沖洗,而且修補(bǔ)工具的頭部也應(yīng)該蘸取少量的甲醇/乙 腈,以避免在取出濾網(wǎng)和玻璃棉濾片時(shí)帶出柱子內(nèi)的填料。
1.先將修補(bǔ)工具中的2套入柱芯的 頂端
2.將修補(bǔ)工具中的3輕輕地旋入已套著2的柱芯中,并順時(shí)針方向旋轉(zhuǎn)到旋緊
3.一手握柱芯,另一只手輕輕地向外拉3,取出柱芯頂端的濾網(wǎng)
4.用一個(gè)小鏟子輕輕地取出濾網(wǎng)下面的玻璃棉以及被污染的填料
5.將新的填料用甲醇潤濕,然后填入挖去的部位,壓平
6.照(下 圖)裝上新的玻璃棉濾網(wǎng),并用修補(bǔ)工具中的4將玻璃棉壓入柱芯頂端
7.柱芯頂端套上2, 然后將濾網(wǎng)放入
8.壓緊,然后取下2,再用4將濾網(wǎng)的邊緣壓平
Ⅲ. 平衡色譜柱
反相色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在乙腈/水 中的。請(qǐng)一定確保您所使用的流動(dòng)相和乙腈/水互溶。由于色譜柱在儲(chǔ)存或運(yùn)輸過程中可能會(huì)干掉,因此在用流動(dòng)相分析樣品之 前,應(yīng)使用10-20倍柱體積的甲醇或乙腈平衡色譜柱;如果您所使用的流動(dòng)相中含有緩沖鹽,應(yīng)注意用純水"過渡"。
硅膠柱或極性色譜柱在經(jīng)過出廠測(cè)試后是保存在正庚烷中的。如果該色譜柱需要使用含水的流動(dòng)相,請(qǐng)?jiān)谑褂昧鲃?dòng)相之前用乙醇或異丙醇 平衡 。
Ⅳ.如何平衡色譜柱?
平衡過程中,將流速緩慢地提高,用流動(dòng)相平衡色譜柱直到獲得穩(wěn)定的基線(緩沖鹽或離子對(duì)試劑度如果較低,則需要較長的時(shí)間來平衡)。
?、? 色譜柱的再生
進(jìn)行色譜柱再生時(shí),應(yīng)使用一個(gè)謙價(jià)的泵,我 們建議最好不使用您的高效液相色譜儀上的泵。
建議 用來沖洗的溶劑體積
注意: 在對(duì)NH2改性的色譜柱進(jìn)行再生時(shí),由于NH2可能成銨根離子的形式存在,因此應(yīng)該在水洗后用0.1M的氨水沖洗,然后再用水沖洗至堿溶液完全流出。如果 簡單的有機(jī)溶劑/水的處理不能夠完全洗去硅膠表面吸附的雜質(zhì),用0.05M稀硫酸沖洗非常有效。