液相色譜儀使用注意事項(xiàng)

安裝液相色譜儀的實(shí)驗(yàn)臺(tái)應(yīng)水平，穩(wěn)固，并具有足夠的放置空間；避免在具有腐蝕性氣體、大量灰塵或能產(chǎn)生強(qiáng)磁場的地方安裝本儀器，否則將會(huì)影響儀器的正常運(yùn)轉(zhuǎn)并且縮短儀器使用壽命；由于儀器所用溶劑是易燃并且有毒，故安裝設(shè)備的房間應(yīng)徹底通風(fēng)，且具有向外排風(fēng)的裝置，否則會(huì)引起中毒或身體不適，也會(huì)引起火災(zāi)；應(yīng)安裝四個(gè)以上三芯電源插座（220V, 5~10A）,必須具有專門的接地線（注意， 絕不能將電源線的中線作為接地線） ， 并確保儀器電源的電壓穩(wěn)定在交流 （220±22）V，否則會(huì)導(dǎo)致儀器的不正常運(yùn)作甚至損壞儀器；如果實(shí)驗(yàn)室無專用的接地線，一般可用Φ15~20mm 的銅棒打入地下 1~1.5米，用Φ1.2mm 左右的塑膠單股導(dǎo)線連接到電源插座的接地端。如果實(shí)驗(yàn)室電壓不穩(wěn)定或者不在交流（220±22）V 范圍內(nèi)，則必須使用具有足夠功率的穩(wěn)壓器等必要設(shè)備，使電源電壓穩(wěn)定。
實(shí)驗(yàn)室的室溫盡可能控制在 15℃-30℃范圍內(nèi)，并且波動(dòng)要??；濕度在45%-85%范圍內(nèi)；
由空調(diào)或其他設(shè)備產(chǎn)生的氣流不要直吹儀器，避免光線直射及振動(dòng)；
儀器啟動(dòng)順序：先開高壓恒流泵和紫外檢測器，待紫外檢測器自檢完畢，回到默認(rèn)波長 254nm 后，打開工作站軟件；
儀器關(guān)閉順序：先按泵停止，關(guān)閉氘燈，退出工作站軟件，然后再關(guān)儀器。
儀器應(yīng)由專人負(fù)責(zé)，明確使用情況，及時(shí)處理和保養(yǎng)。

使用注意事項(xiàng)
流動(dòng)相使用的注意事項(xiàng)
須使用 HPLC 級(jí)或相當(dāng)于該級(jí)別的流動(dòng)相，并要先經(jīng) 0.45μm 薄膜過濾。
過濾后的流動(dòng)相必須經(jīng)過充分脫氣，以除去其中溶解的氣體（如 O 2 ） ，如不脫氣易產(chǎn)生氣泡，增加基線噪聲，造成靈敏度下降，甚至無法分析。
幾中脫氣方法比較：
1. 氦氣脫氣法：利用液體中氦氣的溶解度比空氣低，連續(xù)吹氦脫氣，效果較好，但成本高。
2. 加熱回流法：效果較好，但操作復(fù)雜，且有毒性揮發(fā)污染。
3. 抽真空脫氣法：易抽走有機(jī)相
4. 超聲脫氣法：流動(dòng)相放在超聲波容器中，用超聲波震蕩 10-15 分鐘，此法效果較差，但操作簡單。
如果管路中使用 peek 樹脂部件，請(qǐng)不要使用下列流動(dòng)相：
濃硫酸、濃硝酸、二氯乙酸、丙酮、四氫呋喃、二氯甲烷、氯仿和二甲基亞砜

特別注意：
含有緩沖鹽溶液的流動(dòng)相的清洗方法：
1 ．  先用 10 ：90  的甲醇/ 水沖洗 1  小時(shí)以上，以洗去緩沖鹽
2 ．  再用 90 ：10  的甲醇/水，沖洗系統(tǒng)，并將系統(tǒng)保存在該流動(dòng)相中。清洗時(shí)間至少為 40分鐘。流動(dòng)相的更換
在分析過程中，有時(shí)需要更換流動(dòng)相進(jìn)行分析。一定要注意前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相是不是能夠相溶。 如果前一種使用的流動(dòng)相和所更換的流動(dòng)相不能夠相溶，那您就要特別注意了。要采用一種與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相進(jìn)行過渡、清洗。較為常用的過渡流動(dòng)相為異丙醇，但實(shí)際操作中要看具體情況而定， 原則就是采用與這二種需更換的流動(dòng)相都能夠相溶的流動(dòng)相。一般清洗的時(shí)間為 30-40 分鐘，直至系統(tǒng)完全穩(wěn)定。如不進(jìn)行以上“特別注意”上述步驟的操作，將會(huì)導(dǎo)致系統(tǒng)管路堵塞。嚴(yán)重時(shí)將引起流通池污染堵塞，不得不更換流通池。用戶就要承擔(dān)不必要的損失了。
儲(chǔ)液器的注意事項(xiàng)
保持流動(dòng)相儲(chǔ)液器的清潔是保證儀器正常使用的關(guān)鍵。 要使用 HPLC 級(jí)的溶劑，對(duì)試劑含有緩沖鹽及非 HPLC 級(jí)的流動(dòng)相一定要用 0.5μm 過濾器除去其中的微粒物質(zhì)。管路連接的注意事項(xiàng)
1. 將管子完全插入開口端， 直至其與開口端的末端相碰為止。 否則將產(chǎn)生死體積，引起峰展寬。
2. 為了使柱外效應(yīng)減到最小， 獲得理想的分析結(jié)果， 盡量使用管徑細(xì)的管路作為連接。
3. 管路接頭不要擰的過緊，以防損壞螺紋?；静僮髯⒁馐马?xiàng)
泵運(yùn)行前先打開排空閥，用注射器抽出流動(dòng)相，觀察 10 秒，流動(dòng)相應(yīng)連續(xù)流出；
不用排空閥時(shí)應(yīng)將其關(guān)閉，否則大氣壓力會(huì)使流動(dòng)相從排空閥出口流出；在使用儀器過程中，注意貯液瓶里的流動(dòng)相是否夠用，如快用盡，應(yīng)及時(shí)更換；
更換流動(dòng)相時(shí)務(wù)必停泵，防止吸入大量空氣，影響儀器正常運(yùn)作；
在啟動(dòng)分析進(jìn)樣時(shí)，請(qǐng)快速板動(dòng) 7725i 進(jìn)樣閥，否則會(huì)引起系統(tǒng)壓力突跳，
影響儀器的使用壽命；
如對(duì)樣品分析的定性定量要求較高，應(yīng)配置柱溫箱，保持溫度恒定；
若流動(dòng)相不是純甲醇，樣品分析結(jié)束后，必須用 HPLC 級(jí)甲醇對(duì)泵及進(jìn)樣閥進(jìn)行清洗，大約半小時(shí)后，待壓力重新回落并穩(wěn)定，方可關(guān)泵；
若流動(dòng)相中含有緩沖鹽，則須根據(jù)其特殊的清洗方法進(jìn)行清洗（上述已提到過） 。
 
 
 
各單元日常維護(hù)
色譜柱的保養(yǎng)事項(xiàng)
為了保護(hù)色譜柱，延長其使用壽命，在使用時(shí)應(yīng)采取以下幾方面措施：
應(yīng)在柱頭加燒結(jié)片不銹鋼濾片，需要時(shí)加保護(hù)柱，防止柱頭堵塞，影響分析效果；流動(dòng)相 PH>7 時(shí)用大粒度同種填料作預(yù)柱；溶劑的化學(xué)腐蝕不能太強(qiáng)；要避免微粒在柱頭沉降；
為防止高壓沖擊，泵上的壓力限制不宜太高，一般在 15~20MPa 為宜，在舊柱或梯度洗脫時(shí)應(yīng)稍高些，以避免因上限設(shè)置過低而造成正常使用中的中途停機(jī)；色譜柱長時(shí)間不用，存放時(shí)，柱內(nèi)應(yīng)充滿溶劑（甲醇或乙腈） ，兩端封死。
使用柱溫箱，使色譜柱保持在一個(gè)相對(duì)恒定的溫度，能有效延長色譜柱的使用壽命。

手動(dòng)進(jìn)樣閥的維護(hù)注意事項(xiàng)
在每次使用后，尤其是進(jìn)濃度差異比較大的樣品時(shí)要用專用工具（不是帶針頭的注射器）沖洗進(jìn)樣閥，沖洗時(shí)必須沖洗進(jìn)樣閥兩頭數(shù)次，每次數(shù)毫升。以防止無機(jī)鹽沉積和樣品微粒造成閥內(nèi)部磨損或阻塞以及樣品的交叉污染。
安裝時(shí)進(jìn)樣閥的 5，6 出口要與注射器在同一水平線上，以防止虹吸現(xiàn)象的發(fā)生，導(dǎo)致進(jìn)樣量的重復(fù)性變異。
進(jìn)樣量的多少要根據(jù)定量管的環(huán)體積決定：
當(dāng)樣品量較少時(shí)：進(jìn)樣體積由注射器的進(jìn)樣體積決定，但最大體積要小于環(huán)體積的 1/2。
當(dāng)樣品量較多時(shí)：進(jìn)樣體積由定量管的體積決定，為保證樣品完全把定量管的流動(dòng)相置換干凈，需注射 5-6 倍的環(huán)體積。
要使用專用的液相注射器進(jìn)樣，絕對(duì)不可用氣相注射器尖針頭進(jìn)樣。注射器前應(yīng)用專用的樣品過濾器。

高壓恒流泵的維護(hù)注意事項(xiàng)
泵的密封圈是最易磨損的部件，密封墊圈的損壞可引起系統(tǒng)的許多故障。密封墊圈的壽命與墊圈的材料質(zhì)量，使用壓力大小、保養(yǎng)以及緩沖液的情況而定。采取下列措施可以延長墊圈的壽命：
絕對(duì)不允許在沒有流動(dòng)相或流動(dòng)相還沒有進(jìn)入泵頭的情況下啟動(dòng)泵而造成柱塞桿的干磨；
每天使用后應(yīng)將整個(gè)系統(tǒng)管路中的緩沖液體洗干凈，防止鹽沉積，整個(gè)管路要浸在無緩沖液的溶液或有機(jī)溶劑中；長期不用也在定期開泵沖洗整個(gè)管路；
用 HPLC 級(jí)試劑；
使用不銹鋼濾芯， 以注意防止因泵阻塞造成壓力過高而損壞柱塞桿或燒壞電機(jī)；
壓力下限應(yīng)設(shè)置在 0.5~1MPa,以防止儲(chǔ)液器中的流動(dòng)相被抽干或嚴(yán)重滲漏而引起柱塞桿的干磨；
有柱后清洗功能的高壓恒流泵還要注意保留清洗液， 否則將失去柱后清洗效果。
 
 
泵的壓力不穩(wěn)定
在安裝調(diào)試時(shí)以及在日常使用過程中， 若出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的現(xiàn)象。 原因有幾點(diǎn)：
管路里有氣泡，建議由流動(dòng)相多走些時(shí)間。或打開排空閥，用配件里的針筒多抽幾下。 還有就是關(guān)緊排空閥， 堵住檢測器上的背壓管， 使流通池的壓力增加，趕出氣泡。
輸入單向閥失效所致，這也是經(jīng)常遇見的。首先如何判斷輸入單向閥失效。
判斷步驟為：
如果是雙泵梯度分析系統(tǒng)，故泵壓力不穩(wěn)必然是其中一臺(tái)泵壓力不穩(wěn)所致，須逐個(gè)分析。
1. 在不開 UV 檢測器， 工作站的前提下，將其中一臺(tái)泵接上蒸餾水作為流動(dòng)相。
2. 打開排空閥，用針筒抽出些流動(dòng)相，確認(rèn)泵中已有該流動(dòng)相，然后將針筒內(nèi)的液體排出，并重新接在排空閥上。
3. 按“設(shè)置”鍵直至出現(xiàn)“沖洗”字樣， 按鍵選擇是，按兩次確認(rèn)鍵，啟動(dòng)沖洗功能。流量 5ml/min，時(shí)間 5min（注意：此時(shí)排空閥仍要打開，否則將沖壞色譜柱）
4. 沖洗完畢后，查看針筒內(nèi)流動(dòng)相體積是否為 25ml（5×5=25） ，若正確，則說明該泵在低壓情況下無故障；若不正確，則說明該泵中某一單向閥失效（一般為輸入單向閥） 。
5. 用同樣方法測試另外一泵
6. 等度只要測試一臺(tái)就可以了。
造成單向閥失效原因：
1．液相色譜從成品到客戶手中有一段時(shí)間，出廠前每臺(tái)儀器都要經(jīng)過調(diào)試，一段時(shí)間內(nèi)不用會(huì)造成內(nèi)部殘留流動(dòng)相與寶石球粘連的情況。 客戶長期不用也會(huì)造成類似情況，建議客戶在長期不使用情況下，每周用甲醇作為流動(dòng)相，開機(jī) 1小時(shí)使管路充滿液體。
2．流動(dòng)相內(nèi)雜質(zhì)或其它原因污染了單向閥。雖然有的客戶認(rèn)為流動(dòng)相已過濾過了，但長期使用后，由于液相色譜是微量分析儀器，難免會(huì)產(chǎn)生類似情況。這是液相色譜的普遍現(xiàn)象， 國內(nèi)外的泵只要是被動(dòng)單向閥， 都會(huì)有類似現(xiàn)象發(fā)生，這并不是儀器的質(zhì)量問題，而是日常維護(hù)的一部分?，F(xiàn)在介紹一個(gè)簡單而有效的單向閥失效的處理辦法。

單向閥失效處理方法：
1. 擰下輸入單向閥（一共兩個(gè)）
2. 將 2 個(gè)單向閥放入有蒸餾水的超聲波清洗器，清洗 10 分鐘。
3. 用本公司提供的專用針頭沖一下 （將針頭擰緊在單向閥輸入端即可， 見配件清單） 。沖的時(shí)候注意要用手按住單向閥前頭的墊圈，防止沖時(shí)墊圈被沖落。
4. 完畢后，將輸入單向閥裝回原位即可。 （注意單向閥須擰緊）
若兩個(gè)泵在低壓狀態(tài)下流量都正確， 則建議分別將兩泵連接上色譜柱進(jìn)行高壓測試。
高壓測試具體操作方法：
 
1. 在雙泵分析系統(tǒng)連接的前提下，只須先打開其中一泵（確認(rèn)接好流動(dòng)相）
2. 設(shè)置流量 1ml/min
3. 啟動(dòng)泵
4. 觀察運(yùn)行期間，泵的壓力是否穩(wěn)定。若穩(wěn)定，說明泵無問題；若泵壓力不穩(wěn)，則應(yīng)檢查各管路接頭有無泄露，并將有泄漏的接頭擰緊；若無泄漏，則問題可能還是出在單向閥上，須再次沖單向閥，反復(fù)試驗(yàn)。
（注：不必打開 UV 檢測器）
5. 重復(fù)上述步驟，對(duì)另一臺(tái)泵進(jìn)行高壓測試
如還出現(xiàn)壓力不穩(wěn)的情況，有可能密封圈受損，建議更換。
紫外檢測器的維護(hù)注意事項(xiàng)
要保持檢測器中流通池清潔，每天用后注意沖洗整個(gè)管路。要定期用強(qiáng)溶劑
反向沖洗檢測池（斷開柱） ，以清洗流通池；
流動(dòng)相要用脫過氣的，防止氣泡滯留在流通池內(nèi)，以影響分析結(jié)果；
注意氘燈的保養(yǎng)，為了節(jié)省燈的使用壽命，可在不關(guān)機(jī)的情況下，只把燈關(guān)
掉（建議：最好在需要關(guān)燈時(shí)間 4 小時(shí)以上才關(guān)燈，因?yàn)轭l繁的開關(guān)燈，同樣會(huì)縮短燈的使用壽命） 。
 
注意：液相色譜儀是精密的微量分析儀器， 它的功能充分發(fā)揮離不開您的悉心呵護(hù)。