【菲羅門】維生素HPLC分析知多少？

維生素（Vitamin）是一系列有機(jī)化合物的統(tǒng)稱，蕞先由波蘭化學(xué)家卡西米爾?馮克于1912年提出。

它是生物體所需要的微量營(yíng)養(yǎng)成分，而一般不能通過飲食等手段獲得。

維生素對(duì)生物體的新陳代謝起調(diào)節(jié)作用，適量攝取維生素可以保持身體健康，但過量攝取卻可能會(huì)導(dǎo)致中毒。

維生素也是藥店里保健品版塊的熱門品種。

但是ScienceDaily網(wǎng)站報(bào)道，近期，美國(guó)約翰霍普金斯大學(xué)發(fā)表在《內(nèi)科年報(bào)》上的一份研究表明，幾乎所有的維生素、礦物質(zhì)和其他保健品都不能延長(zhǎng)壽命或預(yù)防心臟病，而復(fù)合鈣和維生素D補(bǔ)充劑可能會(huì)略微增加中風(fēng)的風(fēng)險(xiǎn)。雖然這是可能存在爭(zhēng)議的研究結(jié)果，但對(duì)于國(guó)內(nèi)越來越熱的維生素補(bǔ)劑市場(chǎng)也是起到了一定的降溫作用。

維生素作為重要的食品或者飼料添加劑，在國(guó)標(biāo)或者各種行業(yè)、企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)都有涉及到含量的檢測(cè)。本文分享一下我們對(duì)一些維生素分析的檢測(cè)的案例：

一、食品中維生素、、的測(cè)定（基于）

第一法：食品中維生素A和維生素E的測(cè)定 反相高效液相色譜法

國(guó)標(biāo)中用的是C₃₀柱，水/甲醇的流動(dòng)相體系，30 min的梯度方法，我們使用ACE C18-PFP，用磷酸溶液/乙腈體系，14 min的梯度方法就可以實(shí)現(xiàn)目標(biāo)成分的分離，總體更節(jié)約分析時(shí)間。

第二法：食品中維生素E的測(cè)定 正相高效液相色譜法

國(guó)標(biāo)中用的UPLC的酰胺基柱（1.7u，150*3.0mm）或者HPLC的Si 60硅膠柱（5u，250*4.6mm），以適配不同實(shí)驗(yàn)室的儀器條件。

其中用硅膠柱的方法中流動(dòng)相使用了環(huán)境不友好的二氧六環(huán)，我們?cè)陂_發(fā)方法中避開了該溶劑，使用的流動(dòng)相為正己烷和異丙醇。

第三法：食品中維生素D的測(cè)定 液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

固相萃取柱（硅膠）：Superclean Silica 500 mg/6ml（貨號(hào)：9B-T005-06500）

色譜柱：ACE Excel C18 1.7um 100*2.1mm（貨號(hào)：EXL-171-1002U）

第四法：食品中維生素D的測(cè)定 高效液相色譜法

半制備正相高效液相色譜，色譜柱 ACE Excel SIL 5u 250*4.6mm（貨號(hào)：EXL-127-2546U）

反相液相色譜，國(guó)標(biāo)為甲醇/水=95/5的體系，我們用純甲醇體系：

一、其他維生素分析應(yīng)用（基于中國(guó)藥典和其他企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)）

維生素包括脂溶性和水溶性維生素，由于在色譜上表現(xiàn)差異很大，很多會(huì)選擇不同的色譜柱來分析。

比如ChP. 2015中使用氨基柱來分析水溶性的維C銀翹片中維C的含量，但也有用戶反饋這個(gè)方法的穩(wěn)定性不是太好：

另外，對(duì)于大極性的水溶性維生素，也有用HILIC柱來分析，如使用TitanK HILIC來分析能量飲品中的水溶性維生素（混標(biāo)）：

對(duì)于脂溶性維生素，除了TitanK C18，我們還有ACE C18-amide的應(yīng)用，其中比較難分離維生素D2和D3的分離度非常不錯(cuò)：

蕞后，如果大家有維生素分析的問題，歡迎咨詢您專屬的菲羅門工程師，我們可以提供案例分享、方法推薦和方法開發(fā)等服務(wù)，盡蕞大可能為您解決分析難題。